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來(lái)源：Antioxidants 2024, 13, 1397
摘要核心內(nèi)容
問(wèn)題：兒童癌癥幸存者（CCS）雖生存率提高，但面臨早衰風(fēng)險(xiǎn)，與化療/放療的長(zhǎng)期效應(yīng)相關(guān)。
發(fā)現(xiàn)：CCS的單核細(xì)胞（MNCs）存在抗氧化防御受損（谷胱甘肽通路酶活性降低）和氧化損傷累積（脂質(zhì)、DNA、蛋白質(zhì)損傷），類似老年人水平。機(jī)制上由Nrf2表達(dá)下調(diào)驅(qū)動(dòng)。
干預(yù)：N-乙酰半胱氨酸（NAC）處理可提升Nrf2表達(dá)，修復(fù)抗氧化防御，減少氧化損傷，改善線粒體功能。
意義：靶向氧化還原失衡或可改善CCS長(zhǎng)期健康。
研究目的
探究CCS早衰的分子機(jī)制，重點(diǎn)驗(yàn)證氧化應(yīng)激-抗氧化系統(tǒng)失衡是否為核心驅(qū)動(dòng)因素，并評(píng)估NAC干預(yù)的潛在治療價(jià)值。
研究思路
樣本分組：
實(shí)驗(yàn)組：149例CCS（1-40歲，實(shí)體瘤/血液瘤治愈≥1年）。
對(duì)照組：70例年齡匹配健康人 + 66例老年人（41-96歲）（詳見(jiàn)表1）。
檢測(cè)指標(biāo)：
線粒體功能（氧化磷酸化效率、ROS產(chǎn)生）。
氧化損傷標(biāo)志物（脂質(zhì)、DNA、蛋白質(zhì)）。
抗氧化分子（NADPH、GSH）及關(guān)鍵酶活性/表達(dá)。
Nrf2/KEAP1通路調(diào)控機(jī)制。
干預(yù)實(shí)驗(yàn)：NAC處理CCS-MNCs，評(píng)估上述指標(biāo)的可逆性。
統(tǒng)計(jì)方法：非參數(shù)檢驗(yàn)（Mann-Whitney U test），GraphPad Prism分析。
關(guān)鍵測(cè)量數(shù)據(jù)及意義（附圖表來(lái)源）
1. 線粒體功能障礙與氧化損傷
數(shù)據(jù)：
P/O比值↓（氧化磷酸化效率）：CCS組≈1（健康年輕組≈2.5），與>60歲老人相當(dāng)（圖1A）。
ROS產(chǎn)生↑：CCS組顯著高于年輕組，達(dá)>60歲水平（圖1B）。
氧化損傷累積：MDA、4-HNE（脂質(zhì)）、8-OHdG（DNA）、硝基酪氨酸（蛋白質(zhì)）均升高（圖1C-F）。
意義：證實(shí)CCS存在能量代謝缺陷和氧化應(yīng)激累積，與早衰表型直接相關(guān)。
2. 抗氧化防御系統(tǒng)缺陷
數(shù)據(jù)：
NADPH/NADP↓、GSH/GSSG↓（圖2B, D）。
關(guān)鍵酶活性↓：G6PD、H6PD（NADPH生成）、GR、GPx（谷胱甘肽代謝）、SOD、CAT（圖3A-D, 圖4A-B）。
酶表達(dá)量↓：Western blot顯示G6PD、H6PD、GR、GPx、SOD1/2、CAT蛋白減少（圖3E-I, 圖4C-F）。
意義：抗氧化能力全面下降，導(dǎo)致氧化損傷無(wú)法清除。
3. Nrf2通路失調(diào)
數(shù)據(jù)：
Nrf2蛋白表達(dá)↓（圖5A-B），KEAP1無(wú)變化（圖5C）。
意義：Nrf2作為抗氧化基因的主調(diào)控因子，其下調(diào)是抗氧化防御缺陷的核心機(jī)制。
4. NAC干預(yù)效果
數(shù)據(jù)：
Nrf2表達(dá)↑ → 抗氧化酶表達(dá)/活性恢復(fù)（圖6, 圖7A-F）。
ROS↓、P/O比值↑、氧化損傷標(biāo)志物↓（圖7G-L）。
意義：證實(shí)靶向Nrf2通路可逆轉(zhuǎn)CCS的氧化還原失衡。
Unisense電極測(cè)量數(shù)據(jù)的詳細(xì)解讀
檢測(cè)指標(biāo)：氧消耗速率（OCR）
方法（2.4節(jié)）：
使用丹麥Unisense氧電極，在37°C密閉磁力攪拌反應(yīng)腔中，測(cè)量200,000個(gè)透化MNCs的實(shí)時(shí)耗氧量。底物為丙酮酸+蘋(píng)果酸（激活線粒體呼吸鏈）。
關(guān)鍵結(jié)果（圖1A, 圖7H）：
CCS組OCR正常，但ATP合成效率低（P/O比值↓），表明呼吸鏈與ATP合成解偶聯(lián)。
NAC處理后P/O比值回升，提示線粒體功能修復(fù)。
研究意義：
精準(zhǔn)量化代謝缺陷：Unisense電極提供高分辨率OCR數(shù)據(jù)，直接證明CCS線粒體存在解偶聯(lián)（電子傳遞未有效轉(zhuǎn)化為ATP，導(dǎo)致能量浪費(fèi)和ROS泄漏）。
機(jī)制關(guān)聯(lián)：解偶聯(lián)是ROS過(guò)度產(chǎn)生的主因（圖1B），為氧化損傷提供源頭證據(jù)。
治療驗(yàn)證：NAC干預(yù)后OCR維持但ATP合成效率提升（P/O↑），表明代謝功能可逆，為臨床干預(yù)提供依據(jù)。
結(jié)論
核心機(jī)制：CCS早衰與Nrf2下調(diào)→抗氧化防御缺陷→氧化損傷累積直接相關(guān)，獨(dú)立于癌癥類型或治療時(shí)間。
線粒體作用：氧化磷酸化解偶聯(lián)（Unisense電極證實(shí)）是ROS過(guò)度產(chǎn)生的關(guān)鍵原因。
治療潛力：NAC通過(guò)激活Nrf2通路，修復(fù)抗氧化防御并改善線粒體功能，或可延緩CCS早衰進(jìn)程。
臨床意義：靶向氧化還原失衡（如Nrf2激活劑）是改善CCS長(zhǎng)期生存質(zhì)量的新策略。