Mucosal organs exhibit distinct response signatures to hydrogen sulphide in Atlantic salmon (Salmo salar) 粘膜器官對大西洋鮭 (Salmo salar) 中的硫化氫表現(xiàn)出不同的反應(yīng)特征

來源:Ecotoxicology and Environmental Safety 281 (2024) 116617


1. 摘要核心內(nèi)容


論文研究了亞致死濃度硫化氫(H?S)長期暴露(12天)對大西洋鮭魚(Salmo salar)黏膜器官(鰓、皮膚、嗅球)的影響。通過多組學(xué)分析(轉(zhuǎn)錄組、蛋白組、代謝組)和組織學(xué)評估,發(fā)現(xiàn):

鰓和嗅球?qū)?S更敏感,皮膚響應(yīng)較弱;

H?S觸發(fā)應(yīng)激反應(yīng)基因(如hsp70, hsp90)和炎癥通路(如il1b, il8);

黏膜屏障結(jié)構(gòu)未顯著受損,但鰓次級鰓片長度和黏液細(xì)胞數(shù)量變化顯著;

黏液蛋白組和代謝組顯示器官特異性響應(yīng)(鰓與皮膚響應(yīng)模式不同)。


2. 研究目的


填補(bǔ)知識空白:探究循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)(RAS)中常見的亞致死H?S濃度(0.05–0.12 μM)對鮭魚黏膜防御機(jī)制的長期影響。

評估健康風(fēng)險(xiǎn):明確H?S是否損害黏膜屏障功能,為RAS養(yǎng)殖的鮭魚健康管理提供依據(jù)。


3. 研究思路


暴露實(shí)驗(yàn):

分組:對照組(0 μM)、低濃度組(0.05 μM)、高濃度組(0.12 μM)。

暴露時(shí)長:12天(模擬RAS中長期暴露場景)。

多維度分析:

分子層面:qPCR檢測黏膜器官中24個(gè)基因(解毒、凋亡、免疫等通路)。

蛋白組:皮膚與鰓黏液差異蛋白分析(圖3)。

代謝組:黏液代謝物通路富集分析(圖4)。

組織學(xué):黏膜結(jié)構(gòu)評分、形態(tài)計(jì)量(鰓片長度、黏液細(xì)胞計(jì)數(shù))(圖5)。

空間定位:RNAScope原位雜交硫解毒基因(sqor1, sqor2, suox)(圖6)。


4. 測量數(shù)據(jù)及其意義

關(guān)鍵數(shù)據(jù)來源與意義

數(shù)據(jù)類型 主要發(fā)現(xiàn) 圖表來源 研究意義

基因表達(dá) 鰓/嗅球中應(yīng)激基因(hsp70, hsp90)上調(diào);鰓中il8↑、il10↓;嗅球中il1b↑。 圖2A, 2B 揭示H?S誘導(dǎo)器官特異性炎癥和氧化應(yīng)激,鰓最敏感。

黏液蛋白組 鰓黏液157個(gè)、皮膚黏液127個(gè)差異蛋白;免疫(TLR通路)和代謝過程顯著富集。 圖3A-C 表明H?S通過調(diào)控免疫代謝通路影響?zhàn)つし烙δ堋?

黏液代謝組 鰓vs皮膚:高濃度組25種代謝物差異;氨基酸t(yī)RNA合成通路顯著富集(圖4C-D)。 圖4 反映鰓黏膜代謝重編程(氨基酸合成增強(qiáng)),支持能量需求增加。

組織形態(tài)計(jì)量 高濃度組鰓次級鰓片長度↑(146.5 μm vs 對照124.2 μm),黏液細(xì)胞數(shù)量↓(圖5G-H)。 圖5 提示H?S引起鰓結(jié)構(gòu)適應(yīng)性變化(擴(kuò)大氣體交換面積),但黏液分泌減少。

硫解毒基因定位 sqor1與suox在鰓/嗅球上皮共定位(圖6),皮膚中表達(dá)較弱(補(bǔ)充文件5)。 圖6 證實(shí)黏膜具備H?S解毒能力,但亞致死濃度未顯著激活該通路。

5. 核心結(jié)論


器官差異性響應(yīng):

鰓和嗅球?qū)?S敏感(基因/炎癥顯著變化),皮膚響應(yīng)較弱(圖2)。

嗅球響應(yīng)呈劑量依賴性,鰓則否(如低濃度組il8↑,高濃度組恢復(fù))。

黏膜防御機(jī)制:

硫解毒基因(sqor/suox)在黏膜上皮表達(dá),但亞致死H?S未顯著上調(diào)其表達(dá)(圖6),提示魚類可耐受該濃度。

黏液代謝組和蛋白組顯示鰓與皮膚響應(yīng)模式不同(圖3-4),鰓更偏向氨基酸代謝重編程。

實(shí)際意義:

0.12 μM H?S雖未致死,但誘發(fā)鰓炎癥和結(jié)構(gòu)變化(圖5),可能增加RAS養(yǎng)殖中疾病風(fēng)險(xiǎn)。

需監(jiān)控RAS中H?S濃度(尤其>0.1 μM),以保障鮭魚健康。


6. Unisense電極數(shù)據(jù)的核心意義

數(shù)據(jù)來源與方法


技術(shù):使用丹麥Unisense微電極(amperometric microsensors)實(shí)時(shí)監(jiān)測H?S濃度(圖1a, d)。

系統(tǒng):通過反饋控制系統(tǒng)(圖1b-c)精確維持目標(biāo)濃度(低: 0.05±0.02 μM;高: 0.12±0.09 μM)。


研究意義


精準(zhǔn)暴露控制:

實(shí)現(xiàn)持續(xù)穩(wěn)定的亞致死濃度暴露(傳統(tǒng)方法難以維持低濃度穩(wěn)定性),確保實(shí)驗(yàn)可靠性。

模擬真實(shí)RAS環(huán)境:

所選濃度(0.05–0.12 μM)基于挪威養(yǎng)殖場監(jiān)測數(shù)據(jù)(Fernandes et al., 2024),直接關(guān)聯(lián)產(chǎn)業(yè)痛點(diǎn)。

毒性閾值驗(yàn)證:

支持鮭魚H?S臨界值(H?Scrit = 1.78 μM)的結(jié)論(Bergstedt & Skov, 2023),本研究中亞致死濃度遠(yuǎn)低于該閾值,但仍引發(fā)生理響應(yīng)。

技術(shù)優(yōu)勢:

高靈敏度(檢測限0.02 μM)和實(shí)時(shí)反饋能力,為水產(chǎn)毒理學(xué)研究提供可靠工具,尤其適用于低濃度氣體暴露實(shí)驗(yàn)。


總結(jié)


該研究通過多組學(xué)整合分析,闡明亞致死H?S長期暴露下鮭魚黏膜器官的差異化響應(yīng)機(jī)制,強(qiáng)調(diào)鰓的敏感性及代謝重編程。Unisense電極的應(yīng)用確保了暴露濃度的精確控制,其數(shù)據(jù)驗(yàn)證了RAS中低濃度H?S的潛在風(fēng)險(xiǎn),為養(yǎng)殖管理提供科學(xué)依據(jù):需將H?S濃度控制在0.1 μM以下,并優(yōu)先監(jiān)控鰓健康。