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來源：International Journal of Obesity (2024) 48:512 – 522
1. 摘要核心內(nèi)容
研究背景：肥胖通過脂肪組織（AT）缺氧誘發(fā)慢性炎癥，進(jìn)而促進(jìn)代謝功能障礙相關(guān)脂肪性肝?。∕ASLD）的發(fā)展。但缺氧在肥胖進(jìn)展中的動態(tài)變化及其在肝臟與脂肪組織中的作用時序尚不明確。
方法：采用高脂高果糖飲食（HFHFD）喂養(yǎng)小鼠20周，監(jiān)測不同時間點(diǎn)（4/8/12/16/20周）的代謝指標(biāo)、組織缺氧（活體pO?測量）、基因表達(dá)及組織學(xué)變化，并利用膽堿缺乏高脂飲食（CDAHFD）非肥胖脂肪肝模型驗證。
關(guān)鍵結(jié)果：
脂肪組織缺氧：第8周出現(xiàn)，隨肥胖進(jìn)展持續(xù)加重（圖3A）。
肝臟缺氧：第16周才顯著出現(xiàn)（圖3B），此時處于早期MASLD（單純脂肪變性階段）。
非肥胖模型（CDAHFD）：未檢測到顯著肝臟缺氧（圖3C），提示肥胖相關(guān)過程（如AT缺氧）是肝缺氧的前提。
結(jié)論：AT缺氧是肥胖早期事件，肝臟缺氧發(fā)生于肥胖后期但仍在MASLD早期；肥胖相關(guān)的AT缺氧是MASLD病理機(jī)制的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
2. 研究目的
核心問題：明確進(jìn)行性肥胖過程中，脂肪組織與肝臟缺氧的發(fā)生時序及其在肥胖相關(guān)MASLD發(fā)展中的作用。
驗證假設(shè)：
AT缺氧是否早于肝臟缺氧？
肝臟缺氧是否在MASLD早期（無纖維化/炎癥階段）即存在？
缺氧是否依賴于肥胖相關(guān)代謝紊亂？
3. 研究思路
4. 測量數(shù)據(jù)及意義（附圖表來源）
檢測維度 具體指標(biāo) 研究意義 數(shù)據(jù)來源
代謝表型 體重、血脂（TC/LDL↑）、胰島素抵抗 確認(rèn)肥胖模型成功，代謝紊亂與缺氧關(guān)聯(lián)性 圖1, 表1, 圖S1
組織缺氧 活體pO?（Unisense電極） 直接定量缺氧程度，揭示AT與肝臟缺氧發(fā)生時序差異 圖3A, 3B, 表2
缺氧基因表達(dá)（PCR array） 驗證缺氧通路激活，建立缺氧特征基因模型（如AT中Slc2a1↑） 圖5, 圖6, 表S3-S4
組織染色（pimonidazole陽性面積） 間接證實缺氧，與pO?數(shù)據(jù)一致（AT中r=-0.27, p=0.02） 圖S3
組織病理 脂肪細(xì)胞直徑（AT肥大） 解釋缺氧機(jī)制：肥大>血管生成不足 圖S2
肝臟NAS評分（脂肪變性↑，無纖維化） 明確肝缺氧發(fā)生于MASLD早期（單純脂肪變性階段） 圖2, 表S1
非肥胖模型驗證 CDAHFD肝臟pO?（無顯著缺氧） 佐證肝缺氧需肥胖相關(guān)代謝背景（如AT缺氧），非單純肝損傷導(dǎo)致 圖3C, 表S2
5. 核心結(jié)論
缺氧發(fā)生時序：
脂肪組織：第8周出現(xiàn)缺氧（圖3A），隨肥胖持續(xù)惡化。
肝臟：第16周才顯著缺氧（圖3B），此時處于早期MASLD（單純脂肪變性，NAS=1.5）。
缺氧機(jī)制差異：
AT缺氧由脂肪細(xì)胞肥大 > 血管生成不足驅(qū)動。
肝缺氧與肥胖相關(guān)血流動力學(xué)改變（如肝內(nèi)血管阻力↑）相關(guān)。
肥胖的關(guān)鍵作用：
非肥胖CDAHFD模型（嚴(yán)重MASH但無肥胖）未出現(xiàn)顯著肝缺氧（圖3C），表明肥胖相關(guān)過程（如AT缺氧）是肝缺氧的前提。
臨床意義：
AT缺氧是肥胖早期干預(yù)靶點(diǎn)，可能阻斷MASLD進(jìn)展。
肝缺氧在單純脂肪變性階段已存在，或是推動MASH轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵因素。
6. Unisense電極測量數(shù)據(jù)的詳細(xì)解讀
技術(shù)方法
設(shè)備：丹麥Unisense氧敏感微電極（Clark型，尖端直徑25μm）。
校準(zhǔn)：21% O?水溶液（飽和氧）與無氧溶液（0.1M抗壞血酸鈉）雙點(diǎn)校準(zhǔn)。
操作：
麻醉小鼠開腹后，微操縱器將電極插入性腺AT（2mm）或肝左葉（3mm后退0.5mm）。
每組織測3次，取90秒穩(wěn)定信號均值。
研究意義
直接定量活體缺氧：
克服間接標(biāo)志物（如HIF-1α）受多因素調(diào)控的局限，提供實時原位pO?值（單位：mmHg）。
圖3A/B顯示AT與肝pO?的動態(tài)下降趨勢，明確缺氧發(fā)生時序。
驗證缺氧病理機(jī)制：
pO?降低與脂肪細(xì)胞直徑↑（圖S2）、缺氧基因表達(dá)↑（如AT中Slc2a1，圖5B）、pimonidazole染色↑（圖S3）顯著相關(guān)，多維度交叉驗證結(jié)果可靠性。
揭示器官特異性：
AT pO?在第8周即顯著↓（早于肝），且與代謝參數(shù)（血糖↑、LDL↑）強(qiáng)相關(guān)（表3），提示AT缺氧是肥胖代謝紊亂的早期驅(qū)動因素。
支撐核心結(jié)論：
肝pO?在CDAHFD模型無變化（圖3C），排除單純肝損傷導(dǎo)致缺氧，突出肥胖微環(huán)境的重要性。
技術(shù)優(yōu)勢
高空間分辨率：微電極尖端可定位特定組織區(qū)域（如肝小葉不同區(qū)帶）。
活體動態(tài)監(jiān)測：避免離體組織氧擴(kuò)散造成的測量偏差。
定量精準(zhǔn)性：為基因表達(dá)和組織染色提供客觀基準(zhǔn)，支撐后續(xù)缺氧特征基因模型的建立（圖6）。
總結(jié)
該研究通過Unisense活體pO?監(jiān)測結(jié)合多組學(xué)分析，首次揭示肥胖發(fā)展中AT缺氧早于肝臟缺氧，且肝臟缺氧在MASLD早期（單純脂肪變性階段）即存在。非肥胖模型的陰性結(jié)果表明，肥胖相關(guān)AT缺氧是肝缺氧的必要條件，為靶向AT缺氧預(yù)防MASLD提供了理論依據(jù)。