討論

目前，人們普遍認(rèn)為，血管網(wǎng)絡(luò)的發(fā)展為腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移提供了營(yíng)養(yǎng)和氧氣?；谶@一概念，抗血管生成療法是高效抗腫瘤治療的關(guān)鍵方法。近幾年來(lái)，有關(guān)新型抗血管生成療法的研究層出不窮。然而，一些研究表明，以抑制血管生成為目的的單一療法在抑制腫瘤方面效果不佳。重要的是，抗血管生成療法的療效受到限制，因?yàn)樗鼈冊(cè)谘苌芍衅鹬匾饔茫拖裼醚軆?nèi)皮生長(zhǎng)因子A抑制劑貝伐單抗治療腫瘤一樣。當(dāng)腫瘤擁有異常的血管網(wǎng)絡(luò)時(shí)，腫瘤細(xì)胞對(duì)化療的敏感性就會(huì)降低。盡管存在這些缺點(diǎn)，臨床前和臨床研究表明，在癌癥治療中，抗血管生成療法與化療聯(lián)合使用比單一抗血管生成療法更有效。在本研究中，我們的數(shù)據(jù)也證實(shí)，與單一療法相比，聯(lián)合療法具有抗腫瘤治療的優(yōu)勢(shì)。然而，盡管有這些研究結(jié)果，由抗血管生成藥物和化療藥物組成的聯(lián)合療法的最佳給藥方案仍未完全闡明。

與之前的研究一致，本研究表明，無(wú)論是從腫瘤體積還是腫瘤重量來(lái)看，Endostar單藥治療都不能有效抑制腫瘤生長(zhǎng)。相比之下，Endostar和吉西他濱的聯(lián)合療法能明顯抑制腫瘤的生長(zhǎng)。該療法的積極效果還通過(guò)18F-FDG PET/CT成像進(jìn)行了評(píng)估。18F-FDG是葡萄糖的一種類(lèi)似物，可用于觀察葡萄糖代謝，因此被廣泛用作PET成像的功能性分子生物標(biāo)記物。眾所周知，許多生物活動(dòng)都需要能量，而能量是細(xì)胞正常新陳代謝的必要條件。與正常細(xì)胞不同，腫瘤細(xì)胞使用的大部分能量依賴于糖代謝途徑介導(dǎo)的糖酵解，而不是有氧氧化。因此，抑制增殖會(huì)削弱糖代謝。重要的是，較高的FDG攝取反映了快速的糖代謝，而較低的FDG攝取則意味著糖代謝的減少。因此，在臨床上使用放射性示蹤劑18F-FDG PET/CT是預(yù)測(cè)腫瘤惡性程度的重要方法。我們的數(shù)據(jù)表明，與Endostar單藥治療相比，聯(lián)合治療導(dǎo)致的FDG攝取較慢，這表明Endostar與化療聯(lián)合治療可增強(qiáng)其抗腫瘤效果。此外，還對(duì)各治療組的心臟、肝臟、脾臟、肺臟和腎臟進(jìn)行了H&E染色顯微評(píng)估(圖8)。值得注意的是，這些器官未發(fā)現(xiàn)明顯的形態(tài)學(xué)變化，這表明所采用的聯(lián)合療法對(duì)正常組織沒(méi)有明顯的不良影響。

Endostar與化療聯(lián)合療法增強(qiáng)抗腫瘤效果的現(xiàn)象與腫瘤血管正?；淖兓嘘P(guān)。如前所述，抗血管生成治療可導(dǎo)致腫瘤血管功能和結(jié)構(gòu)正常化。因此，正?；啄?如周細(xì)胞)增加，從而加強(qiáng)了向腫瘤內(nèi)的藥物輸送。周細(xì)胞是成熟微血管的一個(gè)關(guān)鍵特征，如使內(nèi)皮更緊密地接觸和增強(qiáng)血管的穩(wěn)定性。使用α-SMA評(píng)估了周細(xì)胞，α-SMA是血管成熟度和功能的標(biāo)志。本研究表明，與對(duì)照組或僅使用吉西他濱的治療組相比，聯(lián)合使用Endostar和吉西他濱會(huì)導(dǎo)致更多的周細(xì)胞。這些結(jié)果表明，Endostar治療可增加成熟血管的數(shù)量，并使腫瘤血管的功能恢復(fù)正常。因此，與單藥治療相比，抗腫瘤效果得到了增強(qiáng)。缺氧在實(shí)體瘤中很常見(jiàn)，會(huì)影響腫瘤對(duì)放療和化療的敏感性。先前的一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，抗血管生成療法可改善缺氧狀況。在我們的研究中，Endostar單藥和三種聯(lián)合療法都能在治療的第5天和第10天引起更高的氧分壓，這表明Endostar改善了缺氧狀況，提高了化療的抗腫瘤效率。

Peng等人發(fā)現(xiàn)，在人鼻咽癌(NPC)細(xì)胞系CNE-2(CNE-2 NPC)異種移植物中使用Endostar治療5-7天后，或在5-8FNPC異種移植物中使用Endostar治療3-5天后，放療效果有所改善。相反，我們發(fā)現(xiàn)ES+GEM組在治療15天后腫瘤體積最小，F(xiàn)DG攝取最慢。這些結(jié)果表明，與連續(xù)給藥相比，Endostar與吉西他濱同時(shí)給藥是最佳的聯(lián)合療法。此外，根據(jù)Huang等人的研究，與單獨(dú)使用每種藥物治療相比，使用紫杉醇化療后再使用Endostar治療也會(huì)產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。然而，在我們的研究中，ES+GEM組的抗腫瘤效果比ES/GEM組或GEM/ES組更強(qiáng)。我們推測(cè)這一現(xiàn)象可能是由于血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子通路的調(diào)節(jié)所致。

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子信號(hào)在血管生成中起著至關(guān)重要的作用。多項(xiàng)研究表明，化療后血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)增強(qiáng)。也有報(bào)道稱，化療藥物可抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)，而這些藥物也可能誘導(dǎo)血管生成。Endostar是一種抗血管生成藥物，但其作用機(jī)制尚不完全清楚。此外，吉西他濱在治療早期可抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)，但長(zhǎng)期治療會(huì)增加血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)。在我們的研究中，與對(duì)照組相比，單用吉西他濱治療在治療結(jié)束時(shí)對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)無(wú)明顯影響。有趣的是，吉西他濱與Endostar聯(lián)合用藥可同時(shí)顯著降低血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)。這表明Endostar有可能下調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)，這與Li等人之前的研究一致。此外，當(dāng)Endostar與吉西他濱同時(shí)給藥時(shí)，對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的抑制作用會(huì)增強(qiáng)。

吉西他濱作為一種細(xì)胞毒性藥物，主要作用于處于S期的腫瘤細(xì)胞。在本研究中，我們也觀察到吉西他濱治療后細(xì)胞周期停滯在S期。因此，細(xì)胞周期被阻滯，腫瘤細(xì)胞無(wú)法完成增殖。有趣的是，我們的研究表明，Endostar治療后有更多的細(xì)胞處于G0/G1期，Endostar可能會(huì)影響細(xì)胞周期的分布。Xu及其同事也報(bào)告了這一發(fā)現(xiàn)。當(dāng)同時(shí)接受Endostar和吉西他濱聯(lián)合治療時(shí)，處于G0/G1期和S期的細(xì)胞比例都急劇增加。我們的數(shù)據(jù)表明，同時(shí)使用Endostar和吉西他濱可調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的不同階段，從而產(chǎn)生相加效應(yīng)。此外，它還表明，在同時(shí)使用這兩種藥物的情況下，吉西他濱也可能誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯在G0/G1期。

總結(jié)

總之，我們的研究表明，Endostar和吉西他濱同時(shí)治療可發(fā)揮抗腫瘤療法的協(xié)同效應(yīng)。盡管如此，我們的數(shù)據(jù)并未證實(shí)Endostar與吉西他濱聯(lián)合治療的最佳時(shí)間窗。Du等人報(bào)告說(shuō)，較低劑量的Endostar(10毫克/千克)與順鉑同時(shí)給藥會(huì)比單獨(dú)給藥產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，而在Li等人發(fā)表的一項(xiàng)研究中，觀察到的協(xié)同治療效果是在使用20毫克/千克劑量的Endostar后再使用順鉑治療。因此，我們推測(cè)這個(gè)時(shí)間窗可能與Endostar的劑量有關(guān)。需要進(jìn)一步研究探討不同劑量的Endostar單獨(dú)使用或與其他抗腫瘤藥物聯(lián)合使用時(shí)的最佳時(shí)間窗。此外，還需要研究這些化療組合的積極效果，以及哪些患者可能從這些治療中獲益最多。